Thermo Scientific™ Pierce™ Analisi Bradford compatibile con detergenti

Il kit di analisi Thermo Scientific Pierce Bradford compatibile con detergenti è una modifica pronta all'uso del ben noto metodo colorimetrico dye-binding Comassie Bradford per la quantificazione delle proteine totali. Gli additivi del reagente Bradford lo rendono compatibile all'1% o a una percentuale superiore ai detergenti e ai reagenti per lisi, che vengono comunemente utilizzati nella ricerca biologica, tra cui Triton™ X-100 e NP-40.

• Conveniente: curva standard senza detergente
• Flessibile: compatibile con i campioni con e senza detergente
• Campione minimo: richiede solo 10μ l per la procedura per micropiastre
• Colorimetrico: misurazione con uno spettrofotometro standard o un lettore di piastre (595 nm)
• Facile da usare: un solo reagente, nessuna preparazione di reagente
• Rapido: 10 minuti di incubazione a temperatura ambiente
• Ampia gamma: rileva la concentrazione proteica in intervalli da 2 a 1500μ g/ml

Simile al metodo Bradford, il dye-binding Coomassie associa le proteine in un mezzo acido provocando un'immediata modifica nell'assorbimento massimo da 465 nm a 595 nm, con una concomitante variazione di colore da verde a blu. Inoltre, il saggio viene completato in soli 10 minuti.
Il saggio proteico può essere eseguito in una provetta test o in una micropiastra. L'intervallo di funzionamento standard è da 100 a 1500μ g/ml, con un massimo di 1% di detergente (o superiore in alcuni casi). Le concentrazioni proteiche sono stimate tramite riferimento alle assorbenze ottenute per una serie di diluizioni proteiche standard, di solito albumina sierica bovina (BSA), testate insieme a campioni sconosciuti. Poiché la risposta del colore con il dye-binding Coomassie è di tipo non lineare con una concentrazione proteica in aumento, insieme a ciascun saggio è necessario completare una curva standard. Gli standard possono essere utilizzati direttamente, senza preparazione nello stesso detergente rilevato nei campioni di prova.